五波长共焦显微镜与激光扫描共焦显微镜主要特点对比
五波长共焦显微镜与激光扫描共焦显微镜,二者在成像原理上基本是一样的,最大不同之处是照明光源不同。
1、激光扫描共焦显微镜
激光扫描共焦显微镜的照明光源是激光,即单色光。其实际成像过程是根据被观察物体对该单色激光的反射光的强弱来成像的。
优势:由于是单色光照明,没有像差中的色差,所以分辨率较高。
缺点:也由于是单色光照明,不能分辨颜色,对于在同一试样的同一视场内,颜色不同,但对该单色激光反射光强度相同的不同组织或成分不能分辨,容易产生同相异色,同色异相的现象,不利于对微观组织和成分的正确分辨。
2、五波长共焦显微镜
五波长共焦显微镜的光源是氙光源,即白光。其实际成像过程是在白光照明的条件下,通过分光逐点扫描照明,对物体形貌(包括颜色)进行综合的成像。
优势:由于是多色光分光照明和逐点扫描成像,五波长共焦显微镜不仅具有激光扫描共焦显微镜的优点,又能够更真实的反应物体的颜色和形貌,避免了激光扫描共焦显微镜和金相显微镜产生的同相异色,同色异相的现象发生,观察者可以通过颜色,分辨和判断试样的成分和组织。在这方面,其分辨率远强于激光扫描共焦显微镜。
综合分析:在有颜色差异的试样的观察条件下,五波长共焦显微镜避免了激光扫描共焦显微镜产生的同相异色,同色异相的现象发生,观察者可以通过颜色,分辨和判断试样的成分和组织。在这种条件下,五波长共焦显微镜的分辨率高于激光扫描共焦显微镜。在单色试样的观察条件下,分辨率才接近各自的技术指标。然而,在实际观察的试样中,绝大多数不同的组织和成分都是有颜色差异的。对应于没有颜色差异或颜色差异小的试样,可以通过人为的染色(例如腐蚀处理),提高图像的分辨能力。在这一方面,激光扫描共焦显微镜是无能为力的。
另外,分辨率是在特定条件下所能达到的一项技术指标,当在实际使用中,不满足该技术条件时(实际是常常不能满足),其分辨率是达不到所给出的数值。
以下是LASERTEC五波长共焦显微镜与其他公司的普通激光共焦显微镜技术数据比较。
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LASERTEC |
某公司 |
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1.物镜倍率 |
视场 |
视场 |
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10x |
1420 x1140μm |
1280 x 1280μm |
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20x |
710 x 570μm |
640 x 640μm |
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50x |
284 x 228μm |
256 x 256μm |
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100x |
142 x 114μm |
128 x 128μm |
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2. 分辨率 |
X、Y方向:0.13μm
Z方向: 0.01μm |
X、Y方向:0.12μm,
Z方向:0.01μm, |
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3.三维移动距离
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X、Y平面150 x150mm
Z轴15mm |
X、Y平面150x100
Z轴10mm |
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4.测量重复精度 |
0.02μm (3σ) |
0.02μm(3σ) |
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5.扫描时间 |
1)共焦点像
高精细模式 3.5Hz
详细模式 7Hz
网线模式 110Hz
(Wire Frame)
2)非共焦点像 15Hz |
几十秒到一两分钟完成全部的扫描,成像,测量采样工作。 |
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6.扫描波长 |
紫(405nm )、蓝(435nm)、绿(546nm)、黄(577nm)、红(630nm) |
单波长(408nm) |
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